Откако клетките во кои ги одгледуваме

фабрика за ќелиисе контаминирани, повеќето од нив се тешки за ракување.Ако контаминираните клетки се вредни и тешко се добиваат повторно, може да се користат следните методи за нивно отстранување.

1. Користете антибиотици

Антибиотиците се поефикасни во убивањето на бактериите вофабрики за ќелии.Комбинираните лекови се поефикасни од само лековите.Превентивните лекови се поефикасни од лековите по контаминација.Превентивните лекови обично користат двоен антибиотик (пеницилин 100u/mL плус стрептомицин 100μg/mL).По контаминација, методот на чистење треба да биде 5 до 10 пати поголем од вообичаената количина.Лекот треба да се користи 24 до 48 часа по додавањето, а потоа да се замени со вообичаената рутина.Течност за култура.Овој метод може да биде ефикасен во раните фази на контаминација.Покрај пеницилинот и стрептомицинот, користените антибиотици може да вклучуваат и гентамицин, канамицин, полимиксин, тетрациклин, нистатин итн. Најчесто се користат 400 до 800 μg/mL канамицин или 200 μg/mL тетрациклин.Медиумот се менува на секои 2 до 3 дена и се пренесува на лекување од 1 до 2 генерации.Во последниве години, беше објавено дека 4-флуоро, 2-хидроксикинолин (Ципрофлоксацин, Цип), дериват на плеу-ромутилин (дериват на плеу-ромутилин, БМ-циклин2: БМ-1 и дериват на тетрациклин (БМ-2)) ефикасен во убивањето на микоплазмата кога се користи самостојно или во комбинација.Сите овие три антибиотици се подготвени во 250X концентрирани раствори во PBS и се чуваат на -20°C за подоцнежна употреба.Употребната концентрација Cip е 10 μg/mL, BM-1 е 10 μg/mL, а BM-2 е 5 μg/mL.При употреба, прво аспирирајте го контаминираниот медиум за култура, додадете RPMI1640 медиум за култура што содржи BM-1, потоа аспирирајте го медиумот за култура по 3 дена, додадете RPMI1640 медиум за култура што содржи BM-2 и култура 4 дена, и така натаму 3 последователни дена .круга, додека не се докаже со 33258 флуоресцентна микроскопија за боење дека микоплазмата е елиминирана, потоа се додава нормален медиум за култура за култура и премин 3-4 пати.

2. Греење третман

Инкубирањето на контаминирана ткивна култура на 41°C во текот на 18 часа може да ја убие микоплазмата, но има негативни ефекти врз клетките.Затоа, треба да се спроведе прелиминарен тест пред третманот за да се истражи времето на загревање што може да ја убие микоплазмата до максимален степен и да има најмало влијание врз клетките.Овој метод понекогаш е несигурен.Ако прво се третира со лекови, а потоа се загрева на 41°C, ефектот ќе биде подобар.

3. Користете серум специфичен за микоплазма

Контаминацијата со микоплазма може да се отстрани со 5% имунолошки серум на зајачка микоплазма (титар на хемаглутинација 1:320 или погоре).Бидејќи специфичните антитела може да го инхибираат растот на микоплазмата, таа станува негативна 11 дена по третманот со антисерум и останува негативна 5 месеци подоцна.е негативен.Сепак, овој метод е попроблематичен и не е толку удобен и економичен како употребата на антибиотици.

4. Други методи

Покрај горенаведените методи за отстранување на контаминацијата, постојат и методи на инокулација и стерилизација кај животните, методи на фагоцитоза на макрофагите, методи за додавање на бромоурацил на контаминиранишишиња за култураа потоа и нивно зрачење со светлина, и методи на филтрирање итн., но сите тие се попроблематични и понеефикасни.Затоа, штом ќе се појави контаминација со микоплазма, освен ако е од особено важна вредност, таа генерално се фрла и повторно се култивира.

ве молиме контактирајте со Whatsapp & Wechat: +86 180 8048 1709